Expression des protéines membranaires in vivo et in vitro

Laurent Catoire, Oana Ilioaia, Sandrine Masscheleyn, Bruno Miroux, Elodie Point, Dror Warschawski, Francesca Zito

Parmi les difficultés classiquement rencontrées dans l’étude structurale des protéines membranaires, on trouve les problèmes d'agrégation, d'hétérogénéité de l'échantillon purifié, la présence du détergent qui perturbent la cristallogenèse, et enfin le très faible niveau d'expression des protéines membranaires dans des systèmes d'expression hétérologue.

Dans les bactéries, et compte tenu de l’absence totale de compartimentalisation, toutes les étapes de transcription, traduction, d’adressage et de repliement dans la membrane de la bactérie doivent se faire de façon synchronisée.

Notre laboratoire développe deux approches complémentaires pour produire nos PMs d’intérèt :

• la synthèse in vitro des protéines à partir d’extraits bactériens
• l’expression in vivo dans des mutants bactériens adaptés à la surproduction des PMs